微透析技術(shù)作為一種活體取樣方法，在大小鼠實(shí)驗(yàn)研究中廣泛應(yīng)用。其核心部件——大小鼠微透析探針的正確使用和妥善保存直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的質(zhì)量和動(dòng)物福利。以下是詳細(xì)的操作指南：

　　一、大小鼠微透析探針實(shí)驗(yàn)過程中的動(dòng)態(tài)管理

　　1. 實(shí)時(shí)狀態(tài)監(jiān)控

　　配備在線紫外檢測器的系統(tǒng)應(yīng)每小時(shí)記錄一次吸光度圖譜，及時(shí)發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)吸附導(dǎo)致的信號漂移。單純依靠手動(dòng)收集樣本時(shí)，每管樣品開始收集前需丟棄前兩滴液體以消除死體積影響。

　　2. 抗干擾措施實(shí)施

　　為減少動(dòng)物自主活動(dòng)產(chǎn)生的機(jī)械擾動(dòng)，建議采用柔性固定臂配合重量平衡裝置。對于清醒動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可通過訓(xùn)練建立操作性條件反射實(shí)現(xiàn)主動(dòng)配合，降低應(yīng)激反應(yīng)帶來的生理指標(biāo)波動(dòng)。

　　3. 樣本時(shí)效性管控

　　收集后的透析液應(yīng)立即置于冰上暫存，并在2小時(shí)內(nèi)完成冷凍保存。若需長時(shí)間儲存，建議添加蛋白酶抑制劑并分裝于預(yù)硅化的EP管中，避免反復(fù)凍融破壞待測物穩(wěn)定性。

　　二、大小鼠微透析探針回收處理與清洗再生

　　1. 安全取出流程

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后先降低灌流速度至0.5μL/min維持10分鐘，使周圍組織逐漸適應(yīng)無刺激狀態(tài)。輕柔旋轉(zhuǎn)拔出探針，立即用生理鹽水沖洗外部可見血跡，隨后進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)化清洗程序。

　　2. 分級清洗方案

　　① 基礎(chǔ)清洗：依次用去離子水、75%乙醇超聲震蕩各15分鐘；② 深度脫脂：丙酮浸泡過夜后氮?dú)獯蹈桑虎?滅菌處理：高壓蒸汽滅菌（121℃/20min）或環(huán)氧乙烷氣體熏蒸。不同材質(zhì)探針對消毒方式有特定要求，金屬型可選擇高溫滅菌而纖維束型僅限低溫法。

　　3. 性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)

　　再生后的探針需通過跨膜通量測試方可重新投入使用。常用方法包括熒光素鈉通透性實(shí)驗(yàn)和反滲試驗(yàn)，要求恢復(fù)率達(dá)到初始值的90%以上才算合格。不合格者應(yīng)及時(shí)淘汰并記錄報(bào)廢原因。

　　三、大小鼠微透析探針長期存放維護(hù)策略

　　1. 干燥保存環(huán)境

　　清洗干燥后的探針應(yīng)存放于充氮密閉容器內(nèi)，內(nèi)置變色硅膠指示劑監(jiān)控濕度變化。相對濕度必須控制在30%以下以防止霉菌生長，必要時(shí)可投放分子篩干燥劑包增強(qiáng)吸濕效果。

　　2. 避光防氧化措施

　　包裝材料選用不透光鋁箔袋真空封裝，加入抗氧化劑（如維生素C粉末）。儲存柜應(yīng)遠(yuǎn)離窗戶擺放，避免紫外線加速材料老化。定期抽檢存放樣品的顏色變化情況作為質(zhì)量預(yù)警指標(biāo)。

　　3. 周期性巡檢制度

　　建立電子檔案管理系統(tǒng)記錄每個(gè)探針的使用次數(shù)、清洗歷史和性能參數(shù)。每月隨機(jī)抽取庫存中的10%進(jìn)行外觀檢查和流量測試，確保隨時(shí)可用狀態(tài)。超過半年未使用的探針啟用前需重新校準(zhǔn)。